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环凯培养基的灭菌方式简述
发布时间:2018-11-06   点击次数:79次

 环凯培养基检验原理:胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶水解物提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是凝固剂。
  环凯培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。
  环凯培养基使用方法:
  1、称取水解酪蛋白胨(MH)琼脂38g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
  2、试验菌液的制备:从TSA平皿上挑取3—5个形态相似的菌落顶端部分接种MHB或TSB培养基。经36±1℃培养4—6小时后,比浊至0.5麦氏单位。
  3、接种:用无菌棉拭浸取比浊好的菌液,在管壁内轻轻转压除去过多菌液,然后再轻轻涂抹培养基,每一平皿涂抹三次。每次涂抹后均需将平皿转动60度,再行下一次涂抹。每一质控菌株涂抹三个平皿。
  4、贴片:接种后的平皿置室温片刻,待稍干后,用无菌镊子将抗生素纸片均匀贴布于平皿琼脂表面。各纸片间中心间距不得小于24mm,纸片距平皿边不得小于15mm。一旦纸片接触琼脂表面,即不可再移动,因此时药物已开始扩散。
  5、培养:纸片贴妥后,在15—30分钟内,将平皿翻过来置于36±1℃培养16—24h后,观察结果。平皿培养时不宜堆放,以二个相叠为宜。
  环凯培养基特点:
  1.采用国内优质的培养基原料;核心成分采用进口知名品牌原料。
  2.干粉细腻均匀、易溶解、配置后澄清透明。
  3.凝固点低、利于倾注平板及减少对微生物的热损伤。
  4.瓶身瓶盖特别避光设计。改良后的内垫圈紧紧吸附于瓶盖上不易脱落,防潮性能尤佳。
  5.中英文双语标识。
  环凯培养基的灭菌方式简述
  1.首先将环凯培养基内层灭菌筒取出,再向外层锅加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。
  2.放回灭菌桶,并装入待灭菌物品。三角瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞,
  3.加盖,将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓。
  4.通电加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升,当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。
  5.灭菌所需时间到后,切断电源,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的压力降至0时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。如果压力未降到0时,打开排气阀,就会因锅内压力突然下降,使容器内的环凯培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染。

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